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凝胶
(一)凝胶的选择根据所需凝胶体积,估计所需干胶的量。一般葡聚糖凝胶吸水后的凝胶体积约为其吸水量的2倍,例如Sephadex G-20的吸水量为20,1克Sephadex G-200吸水后形成的凝胶体积约40ml。
凝胶的粒度也可影响层析分离效果。粒度细胞分离效果好,但阻力大,流速慢。一般实验室分离蛋白质采用100-200号筛目的的Sephadex G-200效果好,脱盐用Sephadex G-25、G-50,用粗粒,短柱,流速快。
(二)凝胶的制备商品凝胶是干燥的颗粒使用前需直接在欲使用的洗脱液中膨胀。为了加速膨胀,可用加热法,即在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温至近沸,这样可大大中速膨胀,通常在1-2小时内即可完成。
特别是在使用软胶时,自然膨胀需24小时至数天,而用加热法在几小时内就可完成。这种方法不但节约时间,而且还可消毒,除去凝胶中污染的细菌和排除胶内的空气。
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常用三种凝胶的种类型号及性能
凝胶层析常用于分离纯化蛋白质(包括酶类)核酸、多糖、、病毒、氨基酸和等 生物 大分子,
也可用于样品的浓缩和脱盐及测定 生物 大分子的分子质量等方面。
具有设备简单、操作方便、重现性好、产品收率高等特点。
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1.什么是凝胶?有何特征(两个不同)?
外界条件(如温度、外力、电解质或化学反应)的变化使体系由溶液或溶胶转变为一种特殊的半固体状态,即凝胶。
(又称冻胶)其一,凝胶与溶胶(或溶液)有很大的不同。溶胶或溶液中的胶体质点或大分子是独立的运动单位,可以自由行动,因而溶胶具有良好的流动性。凝胶则不然,分散相质点互相连接,在整个体系内形成结构,液体包在其中,随着凝胶的形成,体系不仅失去流动性,而且显示出固体的力学性质,如具有一定的弹性、强度、屈服值等。
其二,凝胶和真正的固体又不完全一样,它由固液两相组成,属于胶体分散体系,共结构强度往往有限,易于遭受变化。改变条件,如改变温度、介质成分或外加作用力等,往往能使结构破坏,发生不可逆变形,结果产生流动。
由此可见,凝胶是分散体系的一种特殊形式,共性质介于固体和液体之间。
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